FBE- Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Lisansüstü Programı - Yüksek Lisans
Bu koleksiyon için kalıcı URI
Gözat
Yazar "Akçeoğlu, Garbis Atam" ile FBE- Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Lisansüstü Programı - Yüksek Lisans'a göz atma
Sayfa başına sonuç
Sıralama Seçenekleri
-
Ögeİn Vivo Evrimsel Mühendislik Yöntemi İle Ticari Bir Maya Suşunun Etanol Direncinin Geliştirilmesi(Fen Bilimleri Enstitüsü, 2011-08-23) Akçeoğlu, Garbis Atam ; Çakar, Zeynep Petek ; Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji ; Molecular Biology and GeneticsYapılan çalışmanın amacı, evrimsel mühendislik stratejisi kullanılarak etanole dirençli Saccharomyces cerevisiae hücreleri elde etmektir. Bu amaçla yaban tip suş (Hef) rastgele mutasyona uğramış (Hef1) popülasyonunu elde etmek amacıyla kimyasal mutajen etil metan sülfonat’a maruz bırakılmıştır. Etanole dirençli bireylerin seçiminde genetik çeşitliliği olan Hef1 populasyonu kullanılmıştır. Sürekli stres seçilim stratejisi geliştirilmiştir. Sürekli stres seçilim stratejisi kültürü strese sürekli maruz bırakarak o stres seviyesine dayanıklı bireyleri elde etme temeline dayanmaktadır. Hayatta kalmayı başarabilen bireylerin metabolizmalarını yüksek stres seviyelerine adapte olmaya eğilimli genetik diziye sahip olmaları beklenir. İlk nesilde hayatta kalmayı başarabilen bireyler bir sonraki stres seleksiyon basamağına geçerler ve stres seviyesi bir sonraki basamakta arttırılır. Başlangıç etanol konsantrasyonunu ve artış aralığını belirlemek amacıyla tarama prosedürü gerçekleştirilmiştir. Tarama sonuçlarına göre başlangıç stres seviyesi için 10 % etanol (v/v) ve artış aralığı için 0.1% etanol (v/v) olmasına karar verilmiştir. Sürekli stres seleksiyon stratejisi ile 28 nesil elde edilmiştir. Seleksiyon stratejisi için 10 farklı birey seçilmiştir. Seçilen bireylere tarama prosedürü, etanole dirençliliklerini ölçmek amacıyla tekrar uygulanmıştır. Mutant 11’in etanole karşı daha fazla direnç geliştirdiği görülmüştür. 6, 8, 11, ve 12 mutantlarının farklı birçok strese çapraz dirençlilikleri en muhtemel sayı metoduyla (MPN) tespit edilmiştir. Sürekli stres seçilim yöntemi ile elde edilen bireylerin metal, sorbitol, yüksek sıcaklık, ozmotik, donma-erime, ve hacmen %20 etanol ani şok stresine çapraz direnç gösterdiği gözlemlenmiştir. Sonuç olarak evrimsel mühendislik yöntemi ile etanole dirençli bireyler elde edilmiştir. İleriki çalışmalarda da etanol direnç mekanizmasının ve bunun diğer stres faktörleri ile ilişkisini anlamak üzere detaylı transkriptomik ve proteomik analizlerin yapılması.